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宜興市恒通風(fēng)機(jī)有限公司

RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項

發(fā)布時間:    來源:宜興市恒通風(fēng)機(jī)有限公司   閱覽次數(shù):468次

線性PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種陽離子聚合物,分子量25000,它能與核酸形成復(fù)合物,并使該復(fù)合物進(jìn)入哺乳動物細(xì)胞。線性PEI轉(zhuǎn)染試劑廣適用于常見細(xì)胞系,如HEK-293、HEK293T、HepG2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等。該試劑即使在有血清存在的情況下,它仍然能的將核酸導(dǎo)入細(xì)胞。78bio公司提供的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑具有如下優(yōu)點:優(yōu)越的轉(zhuǎn)染效率,重組蛋白的高表達(dá)水平,與含血清的培養(yǎng)基相兼容,低細(xì)胞毒性,易于操作?質(zhì)量控制每批次線性PEI轉(zhuǎn)染試劑均經(jīng)過轉(zhuǎn)染測試。將eGFP表達(dá)質(zhì)粒(GeneCopoeiaCat.No.EX-EGFP-Lv01)用EndoFectinTM-Plus轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)入亞融合狀態(tài)的HEK-293細(xì)胞,轉(zhuǎn)染16h后,超過95%的細(xì)胞表達(dá)eGFP。哪家有GMP等級的PEI轉(zhuǎn)染試劑?RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項

RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項,PEI轉(zhuǎn)染試劑

對大多數(shù)細(xì)胞來而言,每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX轉(zhuǎn)染試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1.5~4μL體積線性PEIMAX轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化。.PEIMAX(MW40,000)為Polysciences公司生產(chǎn)的化合物產(chǎn)品,每批產(chǎn)品出廠前都經(jīng)過嚴(yán)格的檢測,保證每批產(chǎn)品都100%合格、穩(wěn)定且品質(zhì)高,但由于作為轉(zhuǎn)染試劑使用過程中有很多實驗室因素(配置方法,PH,水純度,稱量的準(zhǔn)度,dnaRNA純度,細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞品系…)造成溶解出現(xiàn)問題或者轉(zhuǎn)染效率出現(xiàn)差異,所以廠家只受理該產(chǎn)品純度,分子量及重量缺失破損等相關(guān)投訴,針對極個別客戶溶解問題和轉(zhuǎn)染效率問題我們能友善解決。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!浙江高性價比PEI轉(zhuǎn)染試劑哪里有賣GMP等級的PEI轉(zhuǎn)染試劑?

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瞬時轉(zhuǎn)染方法:1.接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,每個孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時,去除生長培養(yǎng)基,替換成無血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。4.孵育細(xì)胞和分析結(jié)果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細(xì)胞至可以分析檢測。轉(zhuǎn)染后5h即可檢測到轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)。請自行確定適合檢測時間。

線性PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種陽離子聚合物,分子量25000,它能與核酸形成復(fù)合物,并使該復(fù)合物進(jìn)入哺乳動物細(xì)胞。線性PEI轉(zhuǎn)染試劑廣適用于常見細(xì)胞系,如HEK-293、HEK293T、HepG2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等。該試劑即使在有血清存在的情況下,它仍然能的將核酸導(dǎo)入細(xì)胞。78bio公司提供的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑具有如下優(yōu)點:優(yōu)越的轉(zhuǎn)染效率,重組蛋白的高表達(dá)水平,與含血清的培養(yǎng)基相兼容,低細(xì)胞毒性,易于操作?質(zhì)量控制每批次線性PEI轉(zhuǎn)染試劑均經(jīng)過轉(zhuǎn)染測試。將eGFP表達(dá)質(zhì)粒(GeneCopoeiaCat.No.EX-EGFP-Lv01)用EndoFectinTM-Plus轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)入亞融合狀態(tài)的HEK-293細(xì)胞,轉(zhuǎn)染16h后,超過95%的細(xì)胞表達(dá)eGFP。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)的產(chǎn)品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!用PEI轉(zhuǎn)染試劑時出現(xiàn)沉淀是什么原因?

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注意事項質(zhì)粒質(zhì)量:請務(wù)必使用高質(zhì)量轉(zhuǎn)染級無內(nèi)質(zhì)粒(推薦使用QIAGEN或者M(jìn)N公司去內(nèi)質(zhì)粒提取試劑盒)。通過260nm光吸收測定DNA濃度,260nm/280nm比值確定DNA純度(比值應(yīng)該在1.8~2.0的范圍之內(nèi))。如有可能,請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質(zhì)粒的完整性。細(xì)胞條件:使用適當(dāng)保存和經(jīng)常傳代的健康細(xì)胞。確保培養(yǎng)基沒有被細(xì)菌、或支原體污染。如果細(xì)胞是近期復(fù)蘇的液氮凍存細(xì)胞,請在轉(zhuǎn)染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細(xì)胞。PEI轉(zhuǎn)染試劑對復(fù)合物孵化的時間是有要求的,一般建議5~20分鐘之間。國產(chǎn)PEI轉(zhuǎn)染試劑好用么

如何辨別假的PEI轉(zhuǎn)染試劑?RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法:

1.接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,每個孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。

2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。

3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時,去除生長培養(yǎng)基,替換成無血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。

4.孵育細(xì)胞和分析結(jié)果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細(xì)胞至可以分析檢測。轉(zhuǎn)染后5h即可檢測到轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)。

歡迎咨詢PEI產(chǎn)品!RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項

上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司位于自由貿(mào)易試驗區(qū)達(dá)爾文路16幢104室,擁有一支專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊。專業(yè)的團(tuán)隊大多數(shù)員工都有多年工作經(jīng)驗,熟悉行業(yè)專業(yè)知識技能,致力于發(fā)展PL Bioscienc,Quan-Lab,Polysciences,Sirion Biote,CN-Bio,Dharmacon,Horizon,Pfenex,Visual Prote的品牌。公司不僅*提供專業(yè)的生物醫(yī)藥科技(人體干細(xì)胞、基因診斷與zhiliao技術(shù)開發(fā)和應(yīng)用除外)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、自有技術(shù)轉(zhuǎn)讓,并提供相關(guān)的技術(shù)咨詢和技術(shù)服務(wù);計算機(jī)軟件的開發(fā)、設(shè)計、制作(音像制品、電子出版物除外)、銷售自產(chǎn)產(chǎn)品;實驗室試劑及耗材(藥品、危險品除外)、化工原料及產(chǎn)品(除危險化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、煙花爆竹、民用baozha物、易制毒化學(xué)品)、儀器儀表、機(jī)械設(shè)備、電子設(shè)備、塑料制品、玻璃制品、辦公用品、電子產(chǎn)品的批發(fā)、進(jìn)出口、傭金代理(拍賣除外)?!疽婪毥?jīng)批準(zhǔn)的項目,經(jīng)相關(guān)部門批準(zhǔn)后方可開展經(jīng)營活動】,同時還建立了完善的售后服務(wù)體系,為客戶提供良好的產(chǎn)品和服務(wù)。誠實、守信是對企業(yè)的經(jīng)營要求,也是我們做人的基本準(zhǔn)則。公司致力于打造的血小板裂解液,WB自動孵育系統(tǒng),微流控器官芯片,藍(lán)牙無線標(biāo)簽機(jī)。

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陜西智慧門診醫(yī)院室內(nèi)導(dǎo)航

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黨的 等 67 人贊同該回答

黨的十九屆五中全會明確指出,在“十四五”時期,要把新發(fā)展理念貫穿發(fā)展全過程和各領(lǐng)域,構(gòu)建新發(fā)展格局,切實轉(zhuǎn)變發(fā)展方式,推動質(zhì)量變革、效率變革、動力變革,實現(xiàn)更高質(zhì)量、更有效率、更加公平、更可持續(xù)、更為 。

南京鋸切應(yīng)用微量潤滑技術(shù)定制
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第1樓
傳統(tǒng) 等 28 人贊同該回答

傳統(tǒng)的冷卻液潤滑方式需要大量的水資源,而且在使用過程中會產(chǎn)生大量的廢液和廢氣,對環(huán)境造成嚴(yán)重的污染。而低溫微量潤滑加工技術(shù)采用微量的潤滑油,減少了潤滑油的使用量,從而降低了對水資源的消耗和對環(huán)境的污染 。

湖南螺紋瓶蓋模具廠商
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第2樓
飲料 等 37 人贊同該回答

飲料瓶蓋模具開模需要注意什么?1. 材料選擇:飲料瓶蓋模具的材料應(yīng)該選擇高硬度、高耐磨性的材料,如優(yōu)良合金鋼。2. 設(shè)計結(jié)構(gòu):飲料瓶蓋模具的設(shè)計結(jié)構(gòu)應(yīng)該合理,能夠滿足產(chǎn)品的要求,同時也要考慮到模具的制 。

廣西血壓檢測存儲柜什么價格
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第3樓
到目 等 57 人贊同該回答

到目前為止,智能儲物柜經(jīng)歷了條碼密碼)、RFID及生物識別三個階段。智能儲物柜進(jìn)入市場初期,主要采用單片機(jī)進(jìn)行設(shè)計,相比機(jī)械式寄存柜,它沒有傳統(tǒng)的機(jī)械鎖結(jié)構(gòu),而是通過單片機(jī)控制驅(qū)動電路打開空的儲物箱, 。

佛山私家庭院假山水池建造設(shè)計合同
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第4樓
假山 等 46 人贊同該回答

假山水池建造設(shè)計需要注意的細(xì)節(jié):在建造假山水池的時候,植物點綴往往能夠起到畫龍點睛之筆。盡管假山水池建造的再好,若是沒有一定的綠色植物點綴,給人的欣賞效果也就不那么的好。整個假山水池當(dāng)中較重要的就是池 。

沈陽大型零件拉削廠家排行
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第5樓
拉削 等 89 人贊同該回答

拉削是一種常見的金屬加工方法,適用于許多不同類型的材料。以下是一些常見的拉削材料:1.鋼:鋼是常見的拉削材料之一。它可以用于制造各種零件,包括軸承、齒輪、螺栓和螺母等。2.鋁:鋁是一種輕質(zhì)、耐腐蝕的金 。

福鼎封口標(biāo)簽廠家
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第6樓
&e 等 75 人贊同該回答

 膠帶行業(yè)產(chǎn)業(yè)布局指出,國際**企業(yè)已在國內(nèi)投資建廠從事膠粘劑和膠粘帶的生產(chǎn)和銷售,搶占國內(nèi)市場,對內(nèi)資企業(yè)帶來很大的競爭壓力。少數(shù)國內(nèi)**企業(yè)雖然在某些中**產(chǎn)品領(lǐng)域已經(jīng)能夠與國外品牌進(jìn)行 。

本地加油
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第7樓
瑞源 等 32 人贊同該回答

瑞源佳油是一款專業(yè)的不用排隊就能加油的小程序,用戶可以迅速查找并導(dǎo)航到附近的加油站,還能在瑞源佳油享受到各種推出的優(yōu)惠活動,在加油過程中,能夠享受到低價格高信譽的快捷加油服務(wù),不需要排隊的加油更快捷更 。

佛山耐磨手指套批發(fā)
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第8樓
我們 等 88 人贊同該回答

我們需要區(qū)分工業(yè)用的手指套和醫(yī)用手指套:防靜電手指套:避免皮膚過敏,防止指尖汗?jié)n污染元件,并能安全泄放操作者所帶的人體靜電荷。生活用普通指套:有防止水進(jìn)入傷口發(fā)生傳染和避免指紋和汗?jié)n污染等作用。指套, 。

江蘇水杯硅膠密封圈圖片
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第9樓
日常 等 31 人贊同該回答

日常知識:硅膠密封圈小配件大作用!現(xiàn)代的家居生活,各種家用電器、生活用品中都有硅膠密封圈的身影,如:保鮮盒、電飯煲、飲水機(jī)、飯盒、保溫盒、保溫箱、水杯、烤箱、磁化杯、 咖啡壺等,其主要作用為防水密封及 。

天津空氣除菌過濾器耐高溫
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第10樓
對于 等 74 人贊同該回答

對于除菌級過濾器雖然定義的方式是按照微生物的截留效率來進(jìn)行的,但是微生物挑戰(zhàn)實驗是破壞性的方法,對符合GMP要求的生產(chǎn)場地和將用于藥品生產(chǎn)的過濾器而言,都是污染性的,因而不可能在日常的生產(chǎn)中作為監(jiān)控手 。

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